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  • Phleomycin腐草霉素(抗生素)
  • 型號:FS0017
  • 報價:900
  • 地區(qū):上海
  • 0
  • Phleomycin腐草霉素(抗生素)由Streptomyces verticillus(輪枝鏈霉菌)的突變株產生的一種糖肽抗生素,屬于博來霉素(bleomycin)家族。抑菌機制在于腐草霉素可結合并插入DNA,從而破壞其雙螺旋結構的完整性。腐草霉素對大多數細菌、真菌、酵母、植物細胞和哺乳動物細胞都有活性,
    CAS號:11006-33-0
  • 021-34600120
產品詳細介紹

Phleomycin腐草霉素 (抗生素)

產品簡介:

產品貨號產品名稱規(guī)格報價(元)
FS0017-1MLPhleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml)1ml900.00
FS0017-5MLPhleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml)5×1ml3400.00

    腐草霉素是分子遺傳學研究中的選擇性抗生素之一,可用于篩選攜帶Sh ble基因的轉染細胞。Sh ble基因來源于Streptoalloteichus hindustanus,其可編碼一種14kDa的蛋白,該蛋白可與腐草霉素強烈結合從而抑制其切割DNA鏈的活性。腐草霉素是由多種結構類似物構成的復合物,這些復合物僅僅在末端胺基有所差異。另外,因屬于銅離子螯合的復合物,溶液呈藍色。

   本品以20mg/ml的無菌溶液形式提供,可直接用于細胞培養(yǎng),在0.1-50μg/ml濃度范圍內,腐草霉素可以抑制大多數好氧細胞的生長。

產品屬性   Phleomycin腐草霉素(抗生素)

CAS號(CAS NO.

11006-33-0

分子式(Formula

C55H85O21N20S2Cu•HCl

分子量(Molecular weight

1525

純度(Purity

>90%(HLPC)

結構式(Structure

運輸與保存方法

冰袋運輸。

4°C-20°C保存。4°C穩(wěn)定保存12個月,-20°C可穩(wěn)定保存18個月。避免反復凍融。

Phleomycin腐草霉素(抗生素)操作方法 

【注1細胞對腐草霉素的敏感性受pH值影響,如pH值越高,敏感性越高;另外,對于高滲透壓培養(yǎng)基如原生質體再生用的培養(yǎng)基,腐草霉素的活性會明顯降低2-3倍。因此也可能通過使用低鹽培養(yǎng)基來降低腐草霉素使用量。

【注2使用前需將低溫存放的腐草霉素置于室溫回溫,之后低速充分混勻。

1大腸桿菌

攜帶bleomycin抗性基因如Sh bleTn5的質粒,一旦轉化進入大腸桿菌受體菌如HB101 DH5a MC1061,賦予其腐草霉素抗性。

腐草霉素抗性的轉化子可以在添加5 μg/ml Phleomycin的低鹽LB瓊脂培養(yǎng)基(Yeast extract 5g/L, Tryptone 10g/L, NaCl 5g/L, Agar 15 g/L, pH 7.5)中進行篩選。加有腐草霉素的平板可于4穩(wěn)定保存1個月。

2酵母菌

釀酒酵母的腐草霉素抗性轉化子可在添加10 μg/ml PhleomycinYEPD培養(yǎng)基中進行篩選。

操作步驟:按常規(guī)方法進行酵母細胞轉化,一旦DNA進入細胞后,用YEPD培養(yǎng)基稀釋細胞并置于搖床上培養(yǎng)6h或過夜,使其抗性性狀得以表達。之后將細胞冰浴1h并涂布培養(yǎng)在添加10 μg/ml PhleomycinYEPDpH 7.0)固體培養(yǎng)基上。

3真菌

根據轉化子對Phleomycin 的敏感性不同,在添加有10-50 μg/ml腐草霉素的再生培養(yǎng)基內進行篩選。先將細胞在4孵育過夜然后置于生長溫度培養(yǎng),可提高其對抗生素的敏感性。

植物細胞

根據植物類型不同,選擇5-25 μg/ml Phleomycin進行轉化子篩選。

哺乳動物細胞

5-50 μg/ml Phleomycin,推薦先通過建立滅殺曲線來確定濃度。與G418做比較,可能需要更長的時間來殺死細胞或者使細胞從平板上脫落,尤其當細胞處于高密度的情況。

依細胞系不同,通常需要5~21天來挑選具腐草霉素抗性的穩(wěn)定轉染細胞。

注意事項:  

1)腐草霉素對濃酸較為敏感,但可短時間暴露于稀酸中。使用前將本品回溫至室溫,并輕輕混勻。

2)腐草霉素有毒,避免直接接觸皮膚,不可吞服。酸性或堿性pH,或次磷酸鈉中會即刻失效。

3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

 

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